ВИЧ-ПЦР

Наряду с системами для серологического анализа, существуют также молекулярные методы
выявления РНК ВИЧ (Метод амплификации нуклеиновых кислот, МАНК). Наиболее
распространенным является метод ПЦР, другие методы (метод разветвленной ДНК [bДНК],
амплификация, основанная на последовательности нуклеиновых кислот [NASBA])
применяются реже.
Количественная оценка содержания РНК ВИЧ («Оценка вирусной нагрузки») является
существенной частью мониторинга ВИЧ-инфекции (Wittek 2007, Thompson 2010). Кроме
того, выполнение ВИЧ-ПЦР предписано при сдаче донорской крови с целью повышения
безопасности полученных препаратов крови. При этом, в отличие от индивидуального
серологического анализа, анализу ПЦР подвергается не каждая проба по отдельности, а, как
правило, используются так называемые пулы для 96 отдельных проб (мини-пулы). Другими
показаниями к выполнению ПЦР является необходимость исключения инфицирования
новорожденных детей от ВИЧ-положительных матерей (см. ниже), уточнение спорных
результатов серологического анализа, а также наличие клинического подозрения на острую
ВИЧ-инфекцию до наступления сероконверсии.
Сегодня ПЦР не является частью первичной диагностики ВИЧ-инфекции, несмотря на то,
что, согласно указаниям производителей, может использоваться с этой целью. С учетом
возможного ложноотрицательного результата, в общих случаях ВИЧ-ПЦР может
использоваться для исключения факта передачи ВИЧ-инфекции, однако лишь условно – она
не может заменить серологический анализа на ВИЧ. Поэтому метод ВИЧ-ПЦР должен
применяться только в дополнение к серологическому анализу, но не вместо него.
Существуют следующие причины ложноотрицательного результата:
1. Несмотря на то, что ВИЧ-2 в Германии не играет основной роли, его доля в первичных
диагнозах составляет около 0,5 %. Метод ВИЧ-ПЦР, используемый в рутинной
клинической практике, позволяет определять исключительно ВИЧ-1. Для получения
молекулярных доказательств носительства ВИЧ-2 требуется дополнительное применение
ПЦР-анализа особого типа.
2. ВИЧ характеризуется высоким генетическим разнообразием. Поэтому при
инфицировании новым или ранее неизвестным вариантом вируса может наблюдаться
снижение чувствительности анализа, что обусловлено мутациями в зонах, связывающихся
с праймерами и зондами. Использование так называемого метода ПЦР «с двойной
мишенью» может свести к минимуму риск получения ложноотрицательного результата,
обусловленного вариабельностью нуклеотидных последовательностей (Chudy 2012; см.
также «ВИЧ-мониторинг»). Применение метода ПЦР «с двойной мишенью» в
исследованиях донорской крови предписано с 2015 года.
3. Организму некоторых ВИЧ-инфицированных пациентов удается сдерживать вирусную
репликацию без антиретровирусной терапии, в связи с чем, несмотря на достоверную
серологическую инфицированность, вирусная РНК в плазме крови методом ПЦР не
обнаруживается («элитный контроллер»). Распространенность элитных контроллеров,
обладающих способностью к длительному подавлению репликации вируса, составляет
менее 1 %, временный контроль наблюдается несколько чаще (Okulicz 2011).
4. Целью антиретровирусной терапии является уменьшение вирусной нагрузки ниже
определяемого уровня. Если бы скрининговое исследование, выполненное с
использованием только метода ПЦР, проводилось на фоне успешной терапии, результат
анализа был бы ложноотрицательным.